Для своєчасного виявлення та лікування туберкульозу важливі точні методи його діагностики. Особливо значущим цей момент стає, коли мова йде про дітей: їх ще недостатньо зміцнів імунітет, гормональні коливання в підлітковому віці, велика кількість стресів — все це робить дітей більш уразливими до розвитку інфекції.
Знайома з дитинства туберкулінова проба (Манту) не тільки не дає на 100% точної відповіді про наявність в організмі збудника, але і володіє побічними ефектами і протипоказаннями. Тому з кожним роком все більша кількість батьків замислюється про те, які аналізи крові на туберкульоз можна здати замість Манту.
Зміст
- Переваги та недоліки проби Манту
- Дослідження крові
- Імуноферментний аналіз
- ПЛР діагностика
- Квантіфероновий тест
- Т-Спот
- Інші методи діагностики
Переваги та недоліки проби Манту
Туберкулинодиагностика пов’язана з ім’ям французького медика Шарля Манту, який і запропонував в 1908 році застосовувати туберкулін (екстракти мікобактерій) під шкіру для виявлення зараженості паличкою Коха. Менш відомим є інша назва цього методу діагностики — проба Пірке (застарілий варіант нашкірному нанесення) на честь австрійського педіатра, котрий ввів в медичний обіг терміни «алергія» і «скарификационная шкірна проба».
Для проведення тесту на туберкульоз підшкірно вводять розчин, що містить 2 ТО (одиниці препарату PPD — туберкуліну, очищеного від білків). Виникає слідом за цим алергічна реакція показує, чи знайомий організм з мікобактеріями. Перевага цього методу в ефективному відстеження динаміки реакції (так званий віраж Манту).
Існує ціла класифікація цих реакцій: починаючи з негативною і закінчуючи надмірною (гиперергической). На жаль, ця класифікація не відрізняється точністю (наприклад, сумнівна реакція, коли з’являється почервоніння будь-якого розміру, прирівнюється до негативної, а позитивна проба може свідчити не про інфікування, а просто про проведеної вакцинації БЦЖ).
Помилки при визначенні походження чутливості до PPD призводять до того, що 40% школярів необгрунтовано перебувають на обліку в протитуберкульозних диспансерах.
Ще одним важливим недоліком проби Манту є що входить до складу фенол (консервант). Крім того, існує ряд дітей, яким ця проба протипоказана:
- страждають шкірними захворюваннями.
- алергіки і астматики.
- мають будь-які хронічні захворювання в період загострення.
На результати проби впливає безліч факторів, наприклад:
- прийом лікарських препаратів.
- недавно перенесені захворювання .
- можливий контакт шкіри з миючими засобами.
- індивідуальна чутливість.
Все вищеперелічене змушує задатися питанням про те, що можна зробити дитині замість Манту.
Дослідження крові
замість Манту останнім часом все частіше вдаються до здачі спеціального аналізу крові на туберкульоз (ТБ). Цей спосіб зарекомендував себе як більш точний, швидкий і зручний. Існує кілька методик визначення збудника туберкульозу в крові.
Імуноферментний аналіз
В основі ІФА лежить серологічний метод дослідження зв’язку між антигенами і антитілами. Специфіка методу полягає в певній імуннохімічної реакції (певні антитіла реагують на конкретні антигени) і введення ферментативної мітки (маркера, який несуть в собі антитіла) за допомогою різних хімічних, біохімічних і імунологічних способів.
ІФА спрямований на виявлення в крові антитіл до ТБ, які свідчать про наявність інфекції (але не обов’язково про розвивається захворювання). Цей метод особливо ефективний для діагностики позалегеневого ТБ і прихованих форм у випадках, коли рентген і біохімічні аналізи мокроти не показують всю картину.
Антигени мікобактерій є специфічними, тому ймовірність помилкового результату вкрай мала. ІФА проводиться пацієнтам на підставі скарг, схожих з симптомами ТБ (кашель, загальна інтоксикація) в якості додаткової діагностики та дітям з протипоказаннями до туберкулінової пробі.
Перевагою даного методу є також його нечутливість до вакцинації БЦЖ.
Для цього аналізу здається кров з вени натщесерце. Крім того, за 12 годин до забору крові потрібно виключити прийом антибіотиків. Результат аналізу зазвичай буває готовий вже через кілька годин. Показник від 0 до 0,8 говорить про відсутність активної форми ТБ.
До недоліків даного тесту відносять неможливість визначення кількості бактерій і все-таки не 100% точність.
ПЛР діагностика
Абревіатура ПЛР розшифровується як полімеразна ланцюгова реакція. Цей метод являє собою дослідження на ДНК-рівні за допомогою ферменту — полімерази. Головна перевага цього аналізу — висока точність завдяки можливості виявити в біоматеріалу (зокрема, в крові, хоча частіше на аналіз береться мокротиння) навіть єдину клітину збудника хвороби.
Цей молекулярно-генетичний метод дозволяє виявляти ТБ на самих ранніх стадіях. Більш того, за допомогою цього тесту можна визначити резистентність мікобактерій до обраних для лікування антибіотиків.
До недоліків дослідження ПЛР на туберкульоз, проведеного замість Манту, відносять його високу вартість (через використання дорогого обладнання) і низьку чутливість цього аналізу конкретно в дитячому віці (у дітей і підлітків можливі помилково негативні результати в широкому інтервалі 25-83% випадків).
Квантіфероновий тест
Квантіфероновий тест (QFN), розроблений американською компанією QIAGEN, являє собою паркан венозної крові в пробірки і подальше вплив на біоматеріал з допомогою антигенів (мікобактеріальних протеїнів) і аналіз клітинно-імунної відповіді (вивільняється гамма-інтерферону).
відповідно до повним протоколом до складу набору для QFN входять три пробірки для контролю негативного (нульова) і позитивного результату (з мітогеном) і пробірку з ТВ-антигенами. Цей спосіб дослідження добре зарекомендував себе вже в 17 великих країнах світу.
Даний тест так само, як і попередні, нечутливий до вакцинації БЦЖ, володіє високою точністю (завдяки використанню високоспецифічних синтетичних білків) і ще більшою, ніж у ПЛР, чутливістю (89%). Інтерферонова тест показаний дітям з протипоказаннями до туберкулінової пробі, але найбільш точним він стає з 4-5 років (за іншими даними, з 2 років), коли зменшується ймовірність помилкового результату.
З 2016 метод QFN пройшов перереєстрацію в Росії і використовується в лабораторіях приватних клінік.
Т-Спот
Т-Спот — сучасний метод дослідження, заснований на лабораторної технології ELISPOT (Enzyme-Linked ImmunoSpot), який вивчає імунну відповідь організму. ELISPOT був розроблений в Швеції ще в 1983 році, а порівняно недавно завдяки працям вчених Оксфордського університету і компанії Oxford Imunotec почали застосовувати для діагностики ТБ. З 2004 року він включений в стандарти Євросоюзу.
Т-Спот схожий з квантіфероновим тестом: також пов’язаний з виробленням гамма-інтерферону. Відмінність цих двох аналізів в тому, що Т-спот визначає саме Т-лімфоцити (звідси і буква Т в назві), які виробляють інтерферон. Т-Спот і QFN в рівній мірі точні і чутливі до мікобактерій і безпечні для застосування в дитячій і підлітковій вікових групах.
Інші методи діагностики
Для туберкульозу властиво наявність безлічі форм і видів , не всі з них характеризуються вираженими симптомами, тому в питанні діагностики ТБ не можна орієнтуватися тільки на один метод.
Одним з найвідоміших способів виявити захворювання є рентгенографія легенів. З її допомогою можна побачити зміни в ураженому органі: кальцинати, вогнища затемнення, інфільтрати. Рентген проводиться відповідно до показань, за призначенням лікаря, за наявності симптомів або в разі неясною картини аналізів.
Різновид рентгенологічного дослідження — флюоографія, яку починають проводити старшим школярам з 15 років і далі щорічно. До досягнення цього віку флюорографія вважається небезпечною (через вплив опромінення на сформувалися органи і системи і підвищеної чутливості дітей до іонізації). У той же час рентген грудної клітини може бути призначений дітям в особливих випадках і тільки фахівцем.
Для діагностики позалегеневих форм туберкульозу рентген є неефективним. У цих випадках замість Манту можна здати аналіз сечі на мікобактерії туберкульозу. Для висівання палички Коха з біоматеріалу проводиться забір ранкової порції сечі. При здачі аналізу необхідно дотримуватися таких правил:
- відмова від прийому медикаментів за 12 годин до збору.
- виключення з раціону продуктів, що впливають на колір рідини (буряк, морква).
- збір біоматеріалу тільки в стерильний контейнер.
Існує три способи визначити наявність мікобактерій в сечі:
- бактериоскопия (з використанням кислотних реактивів, що забарвлюють бактерії в червоний колір).
- бактеріологічний (культивація осаду сечі в живильному середовищі).
- біологічна проба (піддослідному тварині вводиться зразок сечі).
Аналіз сечі в дитячому віці не є достатньо показовим через труднощі правильного збору біоматеріалу.
Ще один спосіб діагностики ТБ — Діаскінтест — різновид Манту, розроблена російськими вченими і застосовується з 2008 року. Відмінність Діаскінтест — в його діючій речовині, більш специфічному, ніж туберкулін (білок ESAT6 / CFP10), який входить і до складу антигенів для ІФА.
Завдяки цьому білку результати Діаскінтест не залежить від проведеної вакцинації БЦЖ, тест позитивний тільки, якщо в організмі є активна туберкульозна паличка. Діаскінтест можна проводити дітям з 1 року.
Його перевагою є доступна ціна і висока, в порівнянні з Манту, точність. Але в деяких випадках батьки відмовляються від підшкірної проби на користь аналізу крові.
В останні роки з’являються нові способи виявлення туберкульозу за допомогою дослідження крові, які можуть замінити собою пробу Манту. І хоча ці методи не дають 100% точності, але краще підходять для застосування в дитячому віці за рахунок своєї безпеки.